尼氏染色實驗代測

尼氏染色原理：

神經(jīng)元細胞體包括一個具有皺褶核膜的大細胞核、稀疏的染色質和一個明顯的核仁。在細胞體中細胞質是尼氏顆粒，即能夠代表粗面內(nèi)質網(wǎng)并在很多神經(jīng)元中產(chǎn)生特異的斑點狀嗜堿性表現(xiàn)的嗜堿性顆粒。尼氏顆?？梢杂煤芏嗳旧珌盹@示如中性紅、亞甲基藍、甲苯胺藍和甲基紫等。染色的變異、pH和分化的時間使一些染色既可以僅突出尼氏物質，也可以顯示神經(jīng)元的細胞核和神經(jīng)膠質。各種神經(jīng)細胞內(nèi)都含有尼氏體，但其形狀、數(shù)量、分布位置常常不同。尼氏體也存在于樹突中，但不在于軸突和胞體的軸丘。尼氏體會因為生理狀態(tài)的變化而變化，尼氏體是神經(jīng)元內(nèi)蛋白質合成的重要部位，當神經(jīng)元受到刺激后，胞體內(nèi)的尼氏體會明顯減少。通常尼氏體能被堿性染料如硫堇、亞-甲藍、甲苯胺藍和焦油紫等染料染成紫藍色。

尼氏染色說明：

1、細胞可做染色，貼壁細胞做爬片后染色，懸浮細胞做滴片后染色。

2、拍照倍數(shù)分100倍，200倍，400倍。正常情況下拍照是200倍3張，400倍3張。

3、全景掃描可看任意倍數(shù)。

實驗操作步驟（僅供參考）

1、常規(guī)脫蠟至水（二甲苯I、二甲苯II各15min，然后梯度酒精脫水：100%I、100%II、95%、90%、80%、70%、50%各5min）

2、蒸餾水沖洗3次，每次5min

3、然后置于60℃溫箱用1%甲苯胺藍染色40 min(或用焦油紫染色30s)

4、蒸餾水洗凈染料后，于分別置于70%，80%和95%以及100%乙醇中脫水，再用二甲苯透明

5、后用中性樹膠封片。

尼氏染色實驗代測